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Cultivo microbiológico de leche de tanque
en Asturias
INTRODUCCIÓN
La producción láctea
en España y en Asturias en particular, está
sufriendo un proceso de cambio y reestructuración radical
debido a la aplicación de las cuotas lácteas y a la
normativa europea 92/46 (traspuesta al derecho nacional en el R.D.
1679/1994) en la que se marcan las normas sanitarias aplicables
a la producción y comercialización de la leche; uno
de los parámetros contemplados es el recuento de células
somáticas (RCS), que en leche cruda de vaca debe ser inferior
a 400.000 por mililitro. Un RCS elevado lleva asociado, generalmente,
la presencia de mamitis pudiendo resumirse sus consecuencias negativas
en:
- Disminución de la producción.
- Eliminación de leche (infectada, residuos de antibióticos,...)
- Eliminación y muerte de animales.
- Trabajo extra.
- Incremento de gastos en veterinario y medicamentos.
- Retraso en el progreso genético.
Para optimizar la producción
en las explotaciones lecheras y evitar las perdidas causadas
por mamitis, se debe desarrollar e impulsar programas de control
y prevención de esta enfermedad. Los microorganismos que
más frecuentemente causan mamitis se pueden dividir en dos
grandes grupos:
- Patógenos ambientales.
- Patógenos contagiosos.
Dentro de este último grupo se encuentran:
Streptococcus agalactiae, Staphylococcus aureus,
y Mycoplasma bovis.
Exceptuando algunas infecciones por
micoplasmas que se pueden originar en distintas partes del
cuerpo del animal, los tres microorganismos entran en la glándula
mamaria a través del canal del pezón. Estos microorganismos
contagiosos sobreviven y crecen en la glándula mamaria pudiendo
causar infecciones a lo largo de semanas, meses o años. La
glándula infectada es la principal fuente de estos organismos
en un rebaño, y su transmisión se lleva a cabo durante
el ordeño.
Para la detección de estos microorganismos una práctica
cada vez más utilizada y aceptada por todos (ganaderos y
veterinarios) es el cultivo microbiológico de leche de tanque,
de esta forma realizaremos un control y seguimiento de las mamitis
del rebaño, siendo capaces de obtener una mayor producción
de leche con una calidad más alta.
Desde el punto de vista de la salud pública se debe tener
en cuenta la posible presencia de enterotoxinas A y D (resistentes
al calor) producidas por Staph.aureus.
OBJETIVO
Como consecuencia de la importancia
que tiene para los productores lácteos la salud de
las ubres de sus vacas, se consideró oportuno realizar un
estudio de la situación real en la Comunidad Asturiana, informando
a los ganaderos del resultado del análisis de su explotación.
Conscientes de que un solo análisis por ganadería
no es suficiente para el control y seguimiento de las mamitis, si
es muy útil para alertar a aquellos productores lácteos
que desconocían la presencia de estos patógenos en
sus rebaños, pudiendo así establecer unas líneas
de control y prevención.
En Febrero de 1.998 Caja de Asturias
y el Laboratorio Interprofesional Lechero de Asturias (L.I.L.A.)
llegan a un acuerdo para desarrollar a lo largo del año en
curso el análisis microbiológico a 2000 explotaciones
ganaderas asturianas con problemas de mamitis, comprometiéndose
la Caja de Asturias a financiar el trabajo laboratorial y facilitar
la divulgación de los resultados y de las medidas preventivas.
PATOGENIA, PREVENCIÓN Y TRATAMIENTO
Los patógenos Staph.
aureus y Strept. agalactiae se encuentran
en las ubres infectadas y el contagio entre cuarterones de un mismo
animal o entre vaca y vaca se realiza durante el ordeño a
través de la máquina de ordeño, manos contaminadas,
paños de limpieza, etc.
La prevención se basa
en un correcto protocolo de ordeño: evitando entradas de
aire al colocar las pezoneras, retirando suavemente las mismas tras
realizar el corte de vacío, realizar baño de pezones,
desinfectar correctamente la máquina de ordeño así
como los paños de limpieza y realizar tratamiento antibiótico
en el secado de los animales.
El tratamiento de los Srept.
agalactiae se basa en terapias a base de penicilinas, ya
sea en lactación o durante el secado. Los Staph. aureus
presentan un bajo índice de curación durante la lactación,
obteniéndose mayores éxitos durante el periodo de
secado.
MATERIAL Y METODO
El estudio se llevó a cabo en
2.019 explotaciones ubicadas en la Comunidad Asturiana, realizándose
los análisis microbiológicos para determinar la presencia
y el recuento de Srept. agalactiae y de Staph.
aureus.
La selección de las ganaderías
a analizar se realizó teniendo en cuenta 2 parámetros:
- Recuento de células somáticas, considerando
las ganaderías prioritarias aquellas que tuviesen un
valor superior a 300.000/ml., pues este valor ya indica la aparición
de posibles problemas.
- Producción láctea, explotaciones que tuviesen
una cuota superior a 80.000 litros/año, ya que en este
grupo se incluyen aquellas ganaderías más profesionalizadas
y que mayor aprovechamiento realizarían del resultado
obtenido en el cultivo.
El total de muestras de tanque
se obtuvo de una muestra recibida en el L.I.L.A. mensualmente para
el pago por calidad, conteniendo el conservante azidiol y siendo
transportadas en refrigeración.
El aislamiento de Srept.
Agalactiae y de Staph. aureus se realizó
mediante siembra de 40 µl de leche en agar sangre suplementada con
5% de sangre de cordero (BioMerieux). Las placas se incubaron a
37 ºC y la lectura se realizó a las 24 y a las 48 horas.
La identificación de las colonias se realizó en base
a su morfología, tinción de Gram, hemólisis
y presencia de catalasa. La confirmación de Srept.
agalactiae se estableció mediante la prueba de CAMP
y aglutinación en latex para el grupo B de Lancefield (Slidex
Strepto B Kit – BioMerieux). L confirmación de los Staph.
aureus se realizó mediante la determinación
de la aglutinación en latex (Slidex Staph kit-BioMerieux)
y mediante galerías de identificación (ID 32 Staph
–BioMerieux).
Se efectuó el recuento de colonias
de morfología compatible con Srept. agalactiae
y Staph. aureus en las placas con el fin de estimar
la prevalencia de vacas excretoras en cada una de las explotaciones
infectadas.
RESULTADOS
Las prevalencias obtenidas para los
dos agentes patógenos analizados Staph. aureus
(43,9%) y Srept. Agalactiae (2,8%) parece reflejar
una elevada incidencia, con una aparente falta de profilaxis y terapia
adecuadas.
|
Staph. aureus
|
887 (43,9%)
|
|
Strep. Agalactiae
|
57 (2,8%)
|
La distribución de las explotaciones
infectadas por Staph. aureus según los
rangos de densidad de excreción es muy similar. El 28,6%
se sitúa en valores inferiores a 50 unidades formadoras de
colonias (ufc)/ml. Valor que se considera aceptable dentro de cualquier
programa de control y prevención de mamitis, debido a la
gran dificultad para erradicarlo.
Respecto a las explotaciones infectadas
con Srept. agalactiae, se puede observar que la mayor
parte de las explotaciones se encuentran en rangos de excreción
superior a 250 ufc/ml. (54,3%) lo que podría deberse a una
elevada prevalencia de vacas excretoras.
| |
< 50 ufc/ml |
51-150 ufc/ml |
151-250 ufc/ml |
> 250 ufc/ml |
| Staph. aureus |
254 (28,6%) |
279 (31,4%) |
127 (14,3%) |
227 (25,5%) |
| Strep. agalactiae |
6(10,5%) |
10 (17,5%) |
10 (17,5%) |
31 (54,3%) |
Las ganaderías en las que no se detectaron estos patógenos
presento una media de los recuentos de células somáticas
inferior ( 471.000/ml.) a aquellas en las que se aisló uno
de ellos (507.000/ml en el caso de Staph. aureus y
692 .000/ml en el caso de Srept. agalactiae) o los
dos patógenos (718.000/ml).
En el caso de explotaciones negativas se comprueba que un alto
porcentaje el 58,0% tiene un recuento de células somáticas
superior a 400.000/ml, en estas explotaciones no se puede afirmar
que esten libres de estos patógenos contagiosos, pero tal
vez haya en estas, una incidencia mayor de mamitis causadas por
patógenos ambientales.
Las explotaciones con recuento de células somáticas
superior a 400.000/ml en las que se aisla Staph. aureus
representan un 63,8%, con Srept.aAgalactiae un 64,2%
y con ambos patógenos en el 88,3% de las ganaderías.
|
Número
explotac. |
RCS >
de 400.000/ml |
RCS mínimo
|
RCS máximo
|
Media
arit. |
Media geom.
|
| Negativas
|
1.118 |
650 (58,0%)
|
300 |
5.149 |
514 |
471 |
| S.
aureus |
844 |
539 (63,8%)
|
300 |
46.160 |
604 |
507 |
| St.agalactiae
|
14 |
9 (64,2%) |
320 |
3552 |
944 |
692 |
| S.
aureus y St.agalactiae |
43 |
38 (88,3%)
|
303 |
1.728 |
782 |
718 |
La distribución de patógenos aislados en función
del grupo de producción (estos grupos se establecen teniendo
en cuenta su cuota de producción lactea anual) pone de manifiesto
que los ganaderos con mayor cuota láctea, superior a 200.000
litros/año, son los que menor incidencia presentan a Staph.
aureus, un 37,5%, siendo en el resto de los grupos similar
la prevalencia. Respecto a la incidencia de Srept. agalactiae
destaca una mayor presencia en los grupos de producción
láctea baja, que comprende a ganaderos con una cuota entre
40.000-60.000 litros/año, en estos se llega a alcanzar un
5,0%.
Cuota láctea
(en miles de litros por año) |
Nº de explotaciones
|
Positivos S.aureus
|
Positivos St.agalactiae
|
| > 200 |
213 |
80 (37,5%) |
7 (3,2%) |
| 100-200 |
887 |
387 (43,6%) |
24 (2,7%) |
| 80-100 |
475 |
215 (45,2%) |
16 (3,3%) |
| 60-80
|
385 |
178 (46,2%)
|
7 (1,8%) |
| 40-60 |
59 |
27 (45,7%) |
3 (5,0%) |
| Total |
2019 |
887 (43,9%) |
57 (2,8%) |
Observando la distribución de estos patógenos en
los municipios, en los cuales se analizaron más de 50 explotaciones
(los más representativos de la cabaña ganadera asturiana),
se observa que los municipios con menor prevalencia de S.
aureus son Coaña (30,7%) y El Franco (33,3%), mientras
que Llanes (59,6%) y Salas (59,8%) son los que mayor prevalencia
presentan.
Los municipios con menor prevalencia de St. agalactiae son
Castropol, Salas y Vegadeo (0%), mientras que los mayor incidencia
presentan son Valdés (4,1%), Gijón (5,5%), y Gozón
(13,3%).
| MUNICIPIO |
Total positivos
S.aureus |
% S.aureus
|
Total positivos
St.agalactiae |
% St.agalactiae
|
Total explot.
|
| |
18 |
54,5 |
3 |
9,1 |
33 |
| ALLANDE |
8 |
44,4 |
1 |
5,6 |
18 |
| AVILES |
4 |
44,4 |
0 |
0,0 |
9 |
| BELMONTE DE MIRANDA
|
2 |
100,0 |
0 |
0,0 |
2 |
| BIMENES |
0 |
0,0 |
0 |
0,0 |
1 |
| BOAL |
9 |
64,3 |
0 |
0,0 |
14 |
| CABRALES |
0 |
0,0 |
0 |
0,0 |
2 |
| CABRANES |
5 |
71,4 |
0 |
0,0 |
7 |
| MUNICIPIO |
Total positivos
S.aureus |
% S.aureus
|
Total positivos
St.agalac. |
% St.agalac |
Total explot.
|
| CANDAMO |
6 |
40,0 |
0 |
0,0 |
15 |
| CANGAS DE NARCEA
|
3 |
100,0 |
0 |
0,0 |
3 |
| CANGAS DE ONIS
|
2 |
66,7 |
0 |
0,0 |
3 |
| CARREÑO
|
20 |
44,4 |
5 |
11,1 |
45 |
| CASTRILLON |
3 |
42,9 |
0 |
0,0 |
7 |
| CASTROPOL |
39 |
44,8 |
0 |
0,0 |
87 |
| COAÑA |
20 |
30,8 |
3 |
4,6 |
65 |
| COLUNGA |
7 |
25,9 |
0 |
0,0 |
27 |
| CORVERA |
9 |
42,9 |
1 |
4,8 |
21 |
| CUDILLERO |
7 |
26,9 |
0 |
0,0 |
26 |
| EL FRANCO |
27 |
33,3 |
1 |
1,2 |
81 |
| GIJON |
22 |
40,7 |
3 |
5,6 |
54 |
| GOZON |
25 |
41,7 |
8 |
13,3 |
60 |
| GRADO |
14 |
73,7 |
0 |
0,0 |
19 |
| GRANDAS DE SALIME
|
2 |
50,0 |
0 |
0,0 |
4 |
| ILLANO |
0 |
0,0 |
0 |
0,0 |
1 |
| ILLAS |
0 |
0,0 |
0 |
0,0 |
3 |
| LANGREO |
1 |
100,0 |
0 |
0,0 |
1 |
| LAS REGUERAS |
19 |
63,3 |
0 |
0,0 |
30 |
| LLANERA |
32 |
55,2 |
2 |
3,4 |
58 |
| LLANES |
31 |
59,6 |
1 |
1,9 |
52 |
| MUROS DE NALON
|
1 |
50,0 |
0 |
0,0 |
2 |
| NAVA |
7 |
38,9 |
1 |
5,6 |
18 |
| NAVIA |
41 |
38,7 |
3 |
2,8 |
106 |
| NOREÑA
|
1 |
50,0 |
0 |
0,0 |
2 |
| OVIEDO |
11 |
64,7 |
1 |
5,9 |
17 |
| PARRES |
5 |
41,7 |
0 |
0,0 |
12 |
| PEÑAMELLERA
ALTA |
1 |
100,0 |
0 |
0,0 |
1 |
| PEÑAMELLERA
BAJA |
5 |
55,6 |
0 |
0,0 |
9 |
| PILOÑA
|
10 |
55,6 |
1 |
5,6 |
18 |
| PRAVIA |
20 |
60,6 |
1 |
3,0 |
33 |
| RIBADEDEVA |
13 |
61,9 |
0 |
0,0 |
21 |
| RIBADESELLA |
13 |
72,2 |
0 |
0,0 |
18 |
| S.M. REY AURELIO
|
0 |
0,0 |
0 |
0,0 |
1 |
| SALAS |
70 |
59,8 |
0 |
0,0 |
117 |
| SAN MARTIN DE OSCOS
|
0 |
0,0 |
0 |
0,0 |
4 |
| SAN TIRSO DE ABRES
|
3 |
60,0 |
0 |
0,0 |
5 |
| SARIEGO |
4 |
33,3 |
0 |
0,0 |
12 |
| SIERO |
14 |
50,0 |
0 |
0,0 |
28 |
| SOTO DEL BARCO
|
2 |
28,6 |
0 |
0,0 |
7 |
| MUNICIPIO |
Total positivos
S.aureus |
% S.aureus
|
Total positivos
St.agalactiae |
% St.agalactiae
|
Total explot.
|
| STA.EULALIA DE OSCOS
|
0 |
0,0 |
0 |
0,0 |
1 |
| TAPIA DE CASARIEGO
|
15 |
19,7 |
2 |
2,6 |
76 |
| TINEO |
140 |
41,9 |
10 |
3,0 |
334 |
| VALDES |
106 |
43,6 |
9 |
3,7 |
243 |
| VEGADEO |
22 |
42,3 |
0 |
0,0 |
52 |
| VILLAVICIOSA |
36 |
39,6 |
1 |
1,1 |
91 |
| VILLAYON |
12 |
27,3 |
0 |
0,0 |
44 |
| TOTAL |
887 |
43,9 |
57 |
2,8 |
2019 |
CONCLUSIONES
La prevalencia de explotaciones
con Staph. aureus y un nivel de excreción superior
a 50 ufc., nivel considerado aceptable dentro de un programa de
control de mamitis es del 79,2% del total de positivos (887 muestras)
lo que representa el 32,8% del total de muestras (2019), lo que
supone una elevada incidencia.
La prevalencia de explotaciones con Strept. agalactiae
es del 2,8%, valor que se puede considerar elevado ya que es un
patógeno que debería ser erradicado por completo de
las explotaciones.
El cultivo microbiológico de
leche de tanque es una herramienta útil para ver la
evolución de las ganaderías y verificar si el control
de mamitis establecido en el rebaño es el adecuado. Debido
a que es una prueba poco sensible, pero altamente específica
se debería realizar de forma rutinaria para así incrementar
su sensibilidad.
El cultivo microbiológico de leche de tanque complementa
el cultivo microbiológico de leche de cuarterones infectados.
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